作者：張文定

作者單位：中國(guó)科(kē)學院古脊椎動物與古人(rén)類研究所

近些年(nián)來(lái)，地質古生(shēng)物學與現代生(shēng)物學、解剖學、組織學等學科(kē)之間的相(xiàng)互交叉，呈現向超微結構甚至分(fēn)子水平迅猛發展的态勢。這種發展得(de)益于新的精密儀器和新的技術引入古生(shēng)物學并得(de)以應用。爲了研究古組織的超微結構，我所于2003年(nián)從(cóng)德國(guó)EXAKT公司引進了包括浸透、包埋、光固化、切割、磨片等整套能獲得(de)硬組織薄片小于0.01mm的設備和技術。這套技術精确地把組織薄片制作過程和結果予以數字化。而且，它的平行粘接、平行制片等儀器，可(kě)使得(de)制作9—10cm樣品的薄片，其厚度誤差小于0.005mm，所用的包埋樹脂，由于采用光固化技術，使得(de)以前難以控制的包埋和固化過程變得(de)十分(fēn)簡單，筆者認爲，這套系統和技術可(kě)以說(shuō)是目前制作牙齒、骨組織、化石古組織薄片最佳的儀器和方法。在此，把用此系統制作化石古組織的方法介紹如(rú)下，以供感興趣者參考。

把化石組織切割成适合包埋容器的小塊；由于古組織長期埋藏在地層中，在組織及其圍岩中含有一些結晶水，必須去(qù)除以使包埋樹脂代之。所以，首先把樣品放(fàng)在烘箱中，在80度下烘烤24小時作脫水處理(lǐ)。冷(lěng)卻後，放(fàng)入盛有Tech 7200包埋劑的燒杯或包埋盒中，避光浸透。10mm厚的小方塊樣品，要徹底浸透約需一周，若使用真空幹燥器，在真空中浸透，時間将會縮短(duǎn)一半。

這套技術使用的包埋樹脂型号是Technovit 720 0VLC(以下簡稱T 7200膠），和現在大(dà)部分(fēn)補牙材料一樣，采用光固化技術。因此，廠(chǎng)家專門(mén)提供一台光固化儀器。

把浸透好的樣品塊移入包埋盒中，（注意讓觀察的樣品面朝下），把T 7200膠倒入包埋盒中，直至淹沒樣品。然後，啓動燈光開關。光固化分(fēn)兩個階段，第一階段，使用低強度黃(huáng)色光源，使包埋劑予以聚合。對10mm厚的樣品塊，約需時間4—5小時。第二階段，使用強光源藍色光源進一步聚合，約需時間8—10小時。第一階段和第二階段之間的切換，由儀器按照(zhào)設定的時間程序自(zì)動完成，隻需在藍色光源熄滅後，關閉儀器電源開關而已。固化過程可(kě)以安排在下班前進行，第二天上班時，即可(kě)以拿到固化好的樣品，其效率之高不言而喻。

EXAKT公司提供一個真空吸附樣品平行固定器，用于把樣品平行地固定在載玻片上。其程序是：先将一個載玻片粘上一塊2厘米大(dà)小的雙面膠帶，把包埋好的樣品塊觀察面對準雙面膠帶粘好，然後啓動真空泵把載有樣品的載玻片吸附在平行固定器的上蓋下。此時，要按比例把一種叫Tech 4000的固定膠調成糊狀，塗在另一個載玻片上（稱之爲下載玻片），将其放(fàng)在平行固定器的下蓋上，然後松開固定上蓋的螺絲，将樣品對準Tech 4000膠，輕輕放(fàng)下，5分(fēn)鍾之後，Tech 4000膠固化，樣品就(jiù)牢牢地粘在下載片上。平行固定器的上下蓋非常平行，因此，粘好後的樣品面和下載玻片互相(xiàng)平行。

把粘有雙面膠帶的載玻片輕輕從(cóng)樣品上取下，留待重複使用。将載有樣品的下載玻片用真空吸附在EXAKT 300CP切割機的平行導向樣品架上（樣品架有多個規格，一般使用的是25x76mm規格的真空吸附架），橫向移動平行導向台，使被切割的樣品面與切割帶初步對

齊（粗調），然後固定平行導向台，調節平行導向台右側的螺旋千分(fēn)尺，以0.002mm的精度向前或向後移動樣品，使樣品面與切割帶精确重合。接下來(lái)，啓動切割機開關，使載有樣品的平行導向台緩慢(màn)地移向高速轉動的切割鋸片，因平行導向台後有一個牽引垂碼，所以，操作時，不許向前推進。相(xiàng)反，操作者還(hái)需用手作制動作用，以防平行導向器向前移動過快(kuài)，導緻撞斷鋸片，或迫使鋸片側向傾斜。

對硬度高的樣品，切割機的轉速要低，反之亦然。

EXAKT 300CP 切割機

研磨機型号是EXAKT 400CS，它由一個速度可(kě)調的磨盤、一個可(kě)調速的橫向往複移動的真空吸附頭和一個單闆計(jì)算機控制的線性差動傳感器（AW 110， 精度爲0.001mm）集合而成。

EXAKT 400CS 精密磨片機

磨樣必須按以下程序進行：鋪一張水磨砂紙在磨盤上，啓動磨片機開關和冷(lěng)卻水，啓動傳感器控制單元，把載有切割好的樣品載玻片吸附在真空頭上，啓動真空頭往複開關，加上垂重砝碼，緩緩地将樣品放(fàng)在磨盤的中央。研磨機即進行自(zì)動研磨，同時，爲傳感控制器預先設置一個研磨數值，當達到此值時，研磨機自(zì)動停止。

此系統提供不同顆粒度的砂紙，研磨時，按由粗到細的程序進行更換，但(dàn)每次更換砂紙必須重啓控制器的一個新的程序，否則，将會出現嚴重的後果。

研磨并抛光好的樣品先用一個精度爲0.001mm的數字千分(fēn)尺進行測量，并做好記錄。然後取一個厚度誤差不超過0.005mm的載玻片（稱上載玻片），用真空泵吸附在精密平行粘片器透明的上闆下；在樣品的表面一字排開滴上2—3滴Tech 7210膠，将其放(fàng)在平行粘片器的下闆上；輕輕擡起載有樣品的平行粘片器下闆，注意觀察，當上載玻片與樣品接觸時，樣品上的7210膠逐漸向四周擴散，此過程不可(kě)過快(kuài)，以免産生(shēng)氣泡。待放(fàng)置平穩後，放(fàng)下精密粘片器的上蓋，開啓藍光燈以固化7210膠，固化時間爲10—12分(fēn)鍾。

EXAKT 402 平行粘片器

把帶有兩個載玻片的樣品，從(cóng)平行粘片器中取出，置放(fàng)在切割機上，按程序四的方法，把靠近上載玻片一端的樣品切割下來(lái)，切割厚度一般控制在約0.15mm。

切割下來(lái)載有樣品的上載玻片，按程序五的方法，從(cóng)粗砂紙到細砂紙逐級研磨，最後，用4000号抛光紙徹底抛光。

要獲得(de)精确的樣品厚度，精密的測量是不可(kě)少的。此系統包含一個精度爲0.001mm的數字千分(fēn)尺，用于随時測量研磨樣品的厚度，測量與計(jì)算得(de)出最後磨好的樣品厚度有以下5個程序：

1、測由四、五程序切割并研磨好的樣品标本塊+下載玻片=A

2、測上載玻片厚=B

3、測标本+下載玻片+上載玻片+7210膠=總厚度(C)，即A+B+7210=C

4、計(jì)算得(de)出7210膠厚（X）7210（X）=C-A-B

5、測磨好的上載玻片+樣品+7210膠（D），計(jì)算得(de)出樣品厚度(S) S=D-X

至此，一個均勻透亮的、精确知道樣品厚度的古組織薄片制作完成，如(rú)根據樣品的成分(fēn)作一些染色，相(xiàng)信觀察和演示會更漂亮些。